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Thermo 正相色譜柱使用和維護說明
日期:2024-11-02 06:15
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摘要:正相色譜柱使用和維護方法說明
1 、 適用鍵合相
正相色譜柱鍵合相包括:Amino、Silica、Cyano 等。
2 、 柱體積
色譜柱的柱體積可以通過以下公式估算:
V 為色譜柱柱體積(mL),r 為色譜柱內(nèi)徑(cm),L 為色譜柱長度(cm)。
3 、 色譜柱柱效測試與保存
反相色譜柱出廠時都經(jīng)過柱效測試,所用化合物為甲苯、鄰-硝基苯胺、對-硝基苯胺、
間-硝基苯胺和硝基苯,如有不同,以柱效報告為準。
在條件允許情況下,請對新色譜柱進行柱效測試。
正相色譜柱出廠時均保存在正辛烷-乙醇溶液中(如有不同,以柱效報告上列明為準)。
4 、 溫度
所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于 60℃。
5 、 樣品
* 好將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解
在初始流動相或極性相近的溶劑中。
樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物,* 好使用 0.5μm 或更小粒徑的濾膜過濾。同時建議在
色譜系統(tǒng)中使用在線過濾器。
樣品溶液如果使用強溶劑(例如,流動相為正己烷,樣品溶劑為乙醇),為達到較好峰
形,需要降低進樣量(以 250x4.6mm 規(guī)格為例,小于 10μL)。
6 、 流動相
正相色譜所用溶劑通常為氯仿、正己烷、乙腈、甲醇、乙醇等。嚴禁使用與色譜柱保存
溶液不互溶的溶劑作為流動相。
對于某些特殊的應(yīng)用(例如親水相互作用色譜),要使用與色譜柱保存溶劑不互溶的溶
劑(例如水)作為流動相時,須使用 20 倍柱體積的異丙醇沖洗色譜柱后,方可使用流動相
進行平衡。
所有流動相,* 好當(dāng)日實驗當(dāng)日配制,并使用 2μm 濾膜過濾。
7 、 色譜柱安裝
請小心操作色譜柱。
不要摔、碰色譜柱,這樣會損壞色譜柱床,使色譜柱性能下降。
使用合適的連接管路和接頭,確保色譜柱連接處死體積降到* 低(使用不銹鋼接頭時需
要尤其注意)。我們建議使用 SLIPFREE 接頭,此接頭與 Thermo 色譜柱以及其他品牌色譜
柱均完 美匹配。
8 、 色譜柱平衡
在進行分析之前,請使用至少 20 倍柱體積的流動相沖洗色譜柱,以使色譜柱達到平衡。
Version 2
若需使用與色譜柱保存溶液不互溶的溶劑作為流動相,請在平衡前使用至少 20 倍柱體
積的異丙醇沖洗色譜柱。
9 、 色譜柱保護
對于“臟”的樣品以及組分未知的樣品,請盡量使用在線濾器或保護柱,如果可能,使
用 SPE 小柱對樣品進行前處理是更好的選擇。上述做法可以有效延長色譜柱使用壽命。
10 、 色譜柱 清洗
常規(guī)清洗:
在儲存色譜柱之前,請用強的溶劑沖洗色譜柱(去除強保留成分,正相色譜柱中通常使
用乙醇),然后使用合適的溶劑儲存色譜柱。
清洗強保留污染物:
如果色譜柱柱效出現(xiàn)大幅下降,且柱效下降可能由于強保留物質(zhì)聚積所導(dǎo)致時,使用如
下試劑依次清洗色譜柱
20 倍柱體積正己烷;
20 倍柱體積異丙醇;
20 倍柱體積乙腈;
20 倍柱體積水;
20 倍柱體積乙腈;
20 倍柱體積異丙醇;
20 倍柱體積正己烷。
11 、 色譜柱保存
正相相色譜柱,保存溶劑通常是含乙醇的正己烷,也可在常規(guī)清洗后直接保存在乙醇中。
如果需要長時間儲藏,則需要注意色譜柱密封,避免保存溶液揮發(fā)。
注意:如果違反上述規(guī)程,可能使色譜柱失去保修。
正相色譜柱鍵合相包括:Amino、Silica、Cyano 等。
2 、 柱體積
色譜柱的柱體積可以通過以下公式估算:
V 為色譜柱柱體積(mL),r 為色譜柱內(nèi)徑(cm),L 為色譜柱長度(cm)。
3 、 色譜柱柱效測試與保存
反相色譜柱出廠時都經(jīng)過柱效測試,所用化合物為甲苯、鄰-硝基苯胺、對-硝基苯胺、
間-硝基苯胺和硝基苯,如有不同,以柱效報告為準。
在條件允許情況下,請對新色譜柱進行柱效測試。
正相色譜柱出廠時均保存在正辛烷-乙醇溶液中(如有不同,以柱效報告上列明為準)。
4 、 溫度
所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于 60℃。
5 、 樣品
* 好將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解
在初始流動相或極性相近的溶劑中。
樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物,* 好使用 0.5μm 或更小粒徑的濾膜過濾。同時建議在
色譜系統(tǒng)中使用在線過濾器。
樣品溶液如果使用強溶劑(例如,流動相為正己烷,樣品溶劑為乙醇),為達到較好峰
形,需要降低進樣量(以 250x4.6mm 規(guī)格為例,小于 10μL)。
6 、 流動相
正相色譜所用溶劑通常為氯仿、正己烷、乙腈、甲醇、乙醇等。嚴禁使用與色譜柱保存
溶液不互溶的溶劑作為流動相。
對于某些特殊的應(yīng)用(例如親水相互作用色譜),要使用與色譜柱保存溶劑不互溶的溶
劑(例如水)作為流動相時,須使用 20 倍柱體積的異丙醇沖洗色譜柱后,方可使用流動相
進行平衡。
所有流動相,* 好當(dāng)日實驗當(dāng)日配制,并使用 2μm 濾膜過濾。
7 、 色譜柱安裝
請小心操作色譜柱。
不要摔、碰色譜柱,這樣會損壞色譜柱床,使色譜柱性能下降。
使用合適的連接管路和接頭,確保色譜柱連接處死體積降到* 低(使用不銹鋼接頭時需
要尤其注意)。我們建議使用 SLIPFREE 接頭,此接頭與 Thermo 色譜柱以及其他品牌色譜
柱均完 美匹配。
8 、 色譜柱平衡
在進行分析之前,請使用至少 20 倍柱體積的流動相沖洗色譜柱,以使色譜柱達到平衡。
Version 2
若需使用與色譜柱保存溶液不互溶的溶劑作為流動相,請在平衡前使用至少 20 倍柱體
積的異丙醇沖洗色譜柱。
9 、 色譜柱保護
對于“臟”的樣品以及組分未知的樣品,請盡量使用在線濾器或保護柱,如果可能,使
用 SPE 小柱對樣品進行前處理是更好的選擇。上述做法可以有效延長色譜柱使用壽命。
10 、 色譜柱 清洗
常規(guī)清洗:
在儲存色譜柱之前,請用強的溶劑沖洗色譜柱(去除強保留成分,正相色譜柱中通常使
用乙醇),然后使用合適的溶劑儲存色譜柱。
清洗強保留污染物:
如果色譜柱柱效出現(xiàn)大幅下降,且柱效下降可能由于強保留物質(zhì)聚積所導(dǎo)致時,使用如
下試劑依次清洗色譜柱
20 倍柱體積正己烷;
20 倍柱體積異丙醇;
20 倍柱體積乙腈;
20 倍柱體積水;
20 倍柱體積乙腈;
20 倍柱體積異丙醇;
20 倍柱體積正己烷。
11 、 色譜柱保存
正相相色譜柱,保存溶劑通常是含乙醇的正己烷,也可在常規(guī)清洗后直接保存在乙醇中。
如果需要長時間儲藏,則需要注意色譜柱密封,避免保存溶液揮發(fā)。
注意:如果違反上述規(guī)程,可能使色譜柱失去保修。